Ultrastructural changes in methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) induced by a novel cyclic peptide ASP-1 from Bacillus subtilis: A scanning electron microscopy (SEM) study / Cambios ultraestructurales en Staphylococcusaureus resistente a meticilina (SARM) inducidos por un nuevo péptido cíclico ASP-1 de Bacillussubtilis: un estudio con microscopio electrónico de barrido (MEB)

ABSTRACT Increasing antimicrobial resistance amongStaphylococcus aureusnecessitates a new antimicrobial with a different site of action. We have isolated a novel cyclic peptide-1 (ASP-1) fromBacillussubtiliswith potent activity against methicillin-resistantS. aureus(MRSA) at a minimum inhibitory concentration (MIC) of 8-64μg/ml. Scanning electron micrographs demonstrated drastic changes in the cellular architecture of ASP-1 treated cells ofS. aureusATCC 29213 and an MRSA clinical isolate at MICs, with damages to the cell wall, membrane lysis and probable leakage of cytoplasmic contents at minimum bactericidal concentrations. The ultrastructure alterations induced by ASP-1 have also been compared with those of oxacillin-treated MRSA cells at its MIC using scanning electron microscopy.

RESUMEN El incremento de la resistencia antimicrobiana entre los tipos deS. aureusexige un nuevo agente antimicrobiano con un sitio de acción diferente. Aislamos un nuevo péptido cíclico (ASP-1) deBacillussubtiliscon potente actividad frente aS. aureusresistente a meticilina (SARM) en una concentración inhibitoria mínima (CIM) de 8-64μg/ml. Las micrografías obtenidas con microscopio electrónico de barrido mostraron cambios drásticos en la arquitectura celular de las células deS. aureusATCC 29213 tratadas con ASP-1, y un aislamiento clínico de SARM a la CIM, con daños a la pared celular, lisis de la membrana y probable fuga de contenido citoplasmático a concentraciones bactericidas mínimas. Comparamos también, las alteraciones de la ultraestructura inducidas por ASP-1 con las de células de SARM tratadas con oxacilina a su CIM, utilizando microscopio electrónico de barrido.

Effect of Light Sources on Bond Strength of Different Composite Resins Repaired with Bulk-Fill Composite / Efecto del tipo de fuente luz en la resistencia adhesiva de distintas resinas compuestas reparados con una resina bulk-fill

Abstract: The aim of this study was to evaluate and compare the effects of different light sources on shear bond strength when bulk-fill composite was used for the repair of different composite resins. A total of 126 samples made from six resin composites with different properties were aged (thermal-cycling with 5000 cycle), exposed to the same surface treatments and adhesive procedure. Then, they were repaired with a bulk-fill composite. At the polymerization step, each group was divided into three subgroups (n=7) and light cured with a QTH light source for 40s and two different LED light sources for 20s. Subsequently, the specimens were aged in distilled water at 37 ºC for 4 weeks and then subjected to shear bond strength test. Then, the specimens were examined under a stereomicroscope to identify modes of failure and visualized by Scanning Electron Microscope. Data obtained from the study were analyzed using ANOVA and Tukey HSD Test (α=0.05). In all groups, the light curing units had an impact on shear bond strength (p<0.05). Among the study groups, the greatest bond strength values were observed in the specimens repaired using the LED and the specimens repaired with the QTH light curing unit had the lowest bond strength values. It was concluded that the content of composite resins and light curing units may influence bond strength of different composites repaired with the bulk-fill composite.

Resumen: El objetivo de este estudio fue evaluar y comparar los efectos de diferentes fuentes de luz sobre la resistencia de la unión al cizallamiento cuando se utiliza una resina bulk-fill para la reparación de diferentes resinas compuestas. Se envejecieron un total de 126 muestras fabricadas con seis compuestos de resina con diferentes propiedades (ciclo térmico con 5000 ciclos), expuestas a los mismos tratamientos de superficie y procedimiento adhesivo. Luego, fueron reparadas con una resina bulk- fill. En el paso de polimerización, cada grupo fue dividido en tres subgrupos (n=7) y fotopolimerizado con una fuente de luz QTH por 40s y dos fuentes de luz LED por 20s. Posteriormente, los especímenes se envejecieron en agua destilada a 37 ºC durante 4 semanas y luego se sometieron a una prueba de resistencia adhesiva de cizalla. Luego, los especímenes fueron examinados bajo un estereomicroscopio para identificar los modos de falla y visualizados por el Microscopio Electrónico de Barrido. Los datos obtenidos del estudio fueron analizados usando el ANOVA y la prueba Tukey HSD (α=0.05). En todos los grupos, las unidades de fotopolimerización tuvieron un impacto en la fuerza de adhesión al cizallamiento (p<0,05). Entre los grupos de estudio, los mayores valores de fuerza de adhesión se observaron en los especímenes reparados utilizando el LED y los especímenes reparados con la unidad de fotopolimerización QTH tuvieron los valores de fuerza de adhesión más bajos. Se llegó a la conclusión de que el contenido de las resinas compuestas y las unidades de fotopolimerización pueden influir en la fuerza de adhesión de los diferentes compuestos reparados con resinas bulk-fill.

Palpos labiales de la mariposa Prestonia clarki (Lepidoptera: Pieridae). Ultraestructura de órganos sensoriales y sensilas / Labial palps of the butterfly Prestonia clarki (Lepidoptera: Pieridae). Ultrastructure of sensilla and sensory organs

Resumen Los trabajos sobre palpos labiales son muy escasos en Lepidoptera y requieren del uso del microscopio electrónico de barrido. Los tres artejos de los palpos labiales de la coliadina Prestonia clarki se describen e ilustran, así como la distribución de las sensilas y de sus estructuras más distintivas: la mancha sensitiva de Reuter y el órgano Palp pit; el artejo basal es de mayor longitud y el distal el de menor. Se encontraron sensilas quéticas tipo 1 en la superficie de la vista lateral externa de los tres artejos. Las sensilas son más especializadas en el parche o mancha sensitiva de Reuter y en el órgano Palp pit. En la vista lateral interna de la sección proximal del artejo basal se observó esa mancha, la cual comprende un área alargada que integra cientos de microtriquias, diferenciada en tres secciones, cuya área adyacente muestra menor número de microtriquias y de menor longitud. En un corte longitudinal del artejo distal, en su porción más apical, se observó el órgano Palp pit, con forma de botella; en su interior se alojan dos tipos de estructuras, cuya disposición fue: sensilas celocónicas en la sección basal y microtriquias en la distal. Además, se encontraron en el interior del Palp pit dos tipos sensilares de difícil determinación, se denominaron sensilas quéticas tipos 2 y 3, así como las sensilas quéticas tipo 1, localizadas en el borde del Palp pit. Los tipos encontrados y su distribución en el Palp pit coinciden con lo descrito por varios autores en otras especies de lepidópteros.

Abstract Research on labial palps of Lepidoptera is scarce and requires the use of Scanning Electron Microscopy techniques. We describe and illustrate the three segments composing the labial palps of the Coliadinae butterfly Prestonia clarki, as well as the distribution of sensilla and both of palp's distinctive structures: the Reuter's sensitive patch and the Palp pit organ; in the palps, the basal segment is the longest, and the distal segment is the shortest. We found chaetic sensilla type 1 on the lateral outer surface of the segments. In the Reuter's sensitive patch and the Palp pit organ, sensilla are specialized. In a lateral internal view of the proximal section of the basal segment, Reuter's sensitive patch looks as an elongated area with hundreds of microtrichia, differentiated into three sections; the adjacent area shows fewer microtrichia of shorter length. In a longitudinal view of the distal segment, at the apex of the segment, is the bottle-shaped Palp pit organ; inside the Palp pit are coeloconic sensilla in the basal section and microtrichia in the distal one. In addition, two indeterminate types of sensilla similar to chaetic ones were found within the Palp pit; which we called chaetic sensilla types 2 and 3; chaetic sensilla type 1 are located on the edge of the Palp pit. The sensilla types and their distribution in the Palp pit agree with those described in other species of Lepidoptera. Rev. Biol. Trop. 66(3): 1324-1346. Epub 2018 September 01.

Análisis fisicoquímico del MTA Angelus ® y Biodentine ® mediante difracción de rayos X, espectrometría de energía dispersiva, fluorescencia de rayos X, microscopio electrónico de barrido y espectroscopía de rayos infrarrojos / Physicochemical analysis of MTA Angelus ® and Biodentine ® conducted with X ray difraction, dispersive energy spectrometry, X ray fluorescence, scanning electron microscope and infra red spectroscopy

El propósito de este estudio fue caracterizar los componentes de los cementos comerciales para uso en odontología MTA Angelus ® Blanco (Angelus, Lodrina, Paraná Brasil) y de Biodentine TM (Septodont, Saint-Maur-des Fosses, Francia) mediante Microscopia Electrónica de Barrido, difracción de rayos X, fluorescencia de rayos X, espectrometría de dispersión de electrones y espectroscopia infrarroja. Los dos cementos se mezclaron según las indicaciones del fabricante. Se les practicó un estudio de textura de superficie mediante el microscopio electrónico de barrido (MEB), un análisis de difracción de rayos X (DRX), un análisis de fluorescencia de rayos X (FRX), un análisis de espectrometría de energía dispersiva (EDS) y un análisis de espectroscopia infrarroja (IR), para determinar los grupos funcionales. Resultados: Se presentó una diferencia en el análisis XRD entre Biodentine presentó Na2O y ZrO2 mientras que están ausentes en el MTA. El MTA presentó Cr2O3 y BiO2 ausentes en el Biodentine. En el análisis de EDS las diferencias fueron en el agente radiopacador y que el Biodentine presentó Cl a diferencia del MTA y en el análisis estadístico realizado, a pesar de que prácticamente se presentaron los mismos componentes, los porcentajes en los contenidos de éstos fueron estadísticamente signifi cativos. En el análisis de MEB hay una gran diferencia, el MTA presenta una superfi cie porosa e irregular, el Biodentine una forma fi brilar e irregular. Conclusión: Existe una gran similitud en los componentes químicos entre el MTA Angelus y Biodentine con excepción de los componentes químicos para proporcionarles radiopacidad, el tamaño y la forma del grano y en el caso del Biodentine el cloruro de calcio.

The aim of the present study was to characterize components of commercial cements used in dentistry MTA Angelus® White (Angelus Lodrina, Parana Brazil) and Biodentine TM (Septodont, Saint-Maurdes Fosses, France). Techniques used for said characterization were Scanning Electron Microscope, X-Ray Diffraction, X Ray Fluorescence, Electron Dispersion Spectrometry, and Infrared Spectroscopy. Both cements were mixed according to manufactures instructions. A study of surface texture was conducted with Scanning Electron Microscope (SEM), and X Ray Diffraction (XRD) analysis, and X Ray fluorescence analysis (XRF), an analysis of Dispersive Energy Spectrometry (DES), as well as an Infra Red Spectroscopy (IRS) in order to determine functional groups. Results: In XRD analysis, a difference was found: Biodentine exhibited Na2O and ZrO2. These elements were absent in MTA. MTA presented Cr2O3 and BiO2 which in turn were absent in Biodentine. EDS analysis revealed that differences were found in the radio-opacifying agent, and that Biodentine presented CaCl2 differing in this from MTA. Statistical analysis conducted revealed statistically signifi cant percentages in contents, even though components were found to be practically the same. SEM analysis revealed marked differences: MTA presented irregular and porous surface whereas Biodentine exhibited irregular and filament form. Conclusion: There is a great similarity in the chemical components of MTA Angelus and Biodentine, with the exception of chemical components providing radio-opacity, the size and form of the grain, and, in Biodentine presence of calcium chloride.

Análisis a través de microscopía electrónica de barrido de dos dientes con tratamiento endodóncico sometidos a altas temperaturas: estudio piloto / Scanning electron microscopy analysis of two endodontically treated teeth subjected to high temperatures: a pilot study

Introducción: el objetivo fue describir los cambios físico-químicos que ocurren en los tejidos y materiales dentales empleados en un tratamiento endodóncico convencional, al ser sometidos a altas temperaturas, a través de microscopía electrónica de barrido (MEB). Métodos: in vitro, se sometieron dos dientes premolares humanos a 200 y 400 ºC respectivamente, con el fin de estandarizar una técnica para la observación de los cambios físicos y químicos en los tejidos dentales (esmalte y dentina) y de los materiales de uso odontológico empleados comúnmente en endodoncia (gutapercha y cemento endodóncico a base de resina epóxica). Resultados: tanto los tejidos como los materiales dentales observados en este estudio piloto, presentaron gran resistencia a las altas temperaturas sin variar considerablemente su macroestructura, de tal manera que los cambios físicos (estabilidad dimensional, fisuras, grietas, fracturas, textura, carbonización) y químicos (elementos químicos constituyentes) pueden llegar a ser identificables y asociarse a cada rango de temperatura específico através del análisis MEB y espectrofotométrico. Conclusiones: los tejidos y los materiales dentales presentan gran resistencia a la acciónde altas temperaturas sin alterar su macroestructura de forma significativa. Del mismo modo, presentan cambios físicos y químicos que pueden contribuir con el proceso de identificación de un cadáver o restos humanos quemados, incinerados o carbonizados.

Introduction: the objective of this study was to describe the physicochemical changes occurring in dental tissues andmaterials used in a conventional endodontic treatment when subjected to high temperatures, by means of scanning electron microscopy(SEM) Methods: in vitro, two human premolar teeth were subjected to temperatures of 200°C and 400°C respectively, with the purpose ofstandardizing a technique for the observation of physical and chemical changes in dental tissues (enamel and dentin) and dental materialscommonly used in endodontic treatment (root canal gutta-percha and epoxy resin-based endodontic cement). Results: both the tissues and the dental materials analyzed in this pilot study presented great resistance to high temperatures without significantly changing their macrostructure; therefore, the physical changes (dimensional stability, cracks, crevices, fractures, texture, carbonization) and the chemical ones (constituent chemical elements) may turn out to be identifiable and associated with each specific temperature range by means of SEM and spectrophotometric analysis. Conclusions: dental tissues and materials display great resistance to the action of high temperatures, without significantly altering their macrostructure. Similarly, they experience physical and chemical changes that may contribute to theprocess of identification of a corpse or human remains that have been burned, incinerated or charred.

Congenital muscular dystrophy. Part II: a review of pathogenesis and therapeutic perspectives / Distrofia muscular congênita. Parte II: revisão da patogênese e perspectivas terapêuticas

The congenital muscular dystrophies (CMDs) are a group of genetically and clinically heterogeneous hereditary myopathies with preferentially autosomal recessive inheritance, that are characterized by congenital hypotonia, delayed motor development and early onset of progressive muscle weakness associated with dystrophic pattern on muscle biopsy. The clinical course is broadly variable and can comprise the involvement of the brain and eyes. From 1994, a great development in the knowledge of the molecular basis has occurred and the classification of CMDs has to be continuously up dated. In the last number of this journal, we presented the main clinical and diagnostic data concerning the different subtypes of CMD. In this second part of the review, we analyse the main reports from the literature concerning the pathogenesis and the therapeutic perspectives of the most common subtypes of CMD: MDC1A with merosin deficiency, collagen VI related CMDs (Ullrich and Bethlem), CMDs with abnormal glycosylation of alpha-dystroglycan (Fukuyama CMD, Muscle-eye-brain disease, Walker Warburg syndrome, MDC1C, MDC1D), and rigid spine syndrome, another much rare subtype of CMDs not related with the dystrophin/glycoproteins/extracellular matrix complex.

As distrofias musculares congênitas (DMCs) são miopatias hereditárias geralmente, porém não exclusivamente, de herança autossômica recessiva, que apresentam grande heterogeneidade genética e clínica. São caracterizadas por hipotonia muscular congênita, atraso do desenvolvimento motor e fraqueza muscular de início precoce associada a padrão distrófico na biópsia muscular. O quadro clínico, de gravidade variável, pode também incluir anormalidades oculares e do sistema nervoso central. A partir de 1994, os conhecimentos sobre genética e biologia molecular das DMCs progrediram rapidamente, sendo a classificação continuamente atualizada. Os aspectos clínicos e diagnósticos dos principais subtipos de DMC foram apresentados no número anterior deste periódico, como primeira parte desta revisão. Nesta segunda parte apresentaremos os principais mecanismos patogênicos e as perspectivas terapêuticas dos subtipos mais comuns de DMC: DMC tipo 1A com deficiência de merosina, DMCs relacionadas com alterações do colágeno VI (Ullrich e Bethlem), e DMCs com anormalidades de glicosilação da alfa-distroglicana (DMC Fukuyama, DMC "Muscle-eye-brain" ou MEB, síndrome de Walker Warburg, DMC tipo 1C, DMC tipo 1D). A DMC com espinha rígida, mais rara e não relacionada com alterações do complexo distrofina-glicoproteínas associadas-matriz extracelular também será abordada quanto aos mesmos aspectos patogênicos e terapêuticos.

Congenital muscular dystrophy: part I: a review of phenotypical and diagnostic aspects / Distrofia muscular congênita: parte I: revisão dos aspectos fenotípicos e diagnósticos

The congenital muscular dystrophies (CMDs) are a group of genetically and clinically heterogeneous hereditary myopathies with preferentially autosomal recessive inheritance, that are characterized by congenital hypotonia, delayed motor development and early onset of progressive muscle weakness associated with dystrophic pattern on muscle biopsy. The clinical course is broadly variable and can comprise the involvement of the brain and eyes. From 1994, a great development in the knowledge of the molecular basis has occurred and the classification of CMDs has to be continuously up dated. We initially present the main clinical and diagnostic data concerning the CMDs related to changes in the complex dystrophin-associated glycoproteins-extracellular matrix: CMD with merosin deficiency (CMD1A), collagen VI related CMDs (Ullrich CMD and Bethlem myopathy), CMDs with abnormal glycosylation of alpha-dystroglycan (Fukuyama CMD, Muscle-eye-brain disease, Walker-Warburg syndrome, CMD1C, CMD1D), and the much rarer CMD with integrin deficiency. Finally, we present other forms of CMDs not related with the dystrophin/glycoproteins/extracellular matrix complex (rigid spine syndrome, CMD1B, CMD with lamin A/C deficiency), and some apparently specific clinical forms not yet associated with a known molecular mechanism. The second part of this review concerning the pathogenesis and therapeutic perspectives of the different subtypes of CMD will be described in a next number.

As distrofias musculares congênitas (DMCs) são miopatias hereditárias geralmente, porém não exclusivamente, de herança autossômica recessiva, que apresentam grande heterogeneidade genética e clínica. São caracterizadas por hipotonia muscular congênita, atraso do desenvolvimento motor e fraqueza muscular de início precoce associada a padrão distrófico na biópsia muscular. O quadro clínico, de gravidade variável, pode também incluir anormalidades oculares e do sistema nervoso central. A partir de 1994, os conhecimentos sobre genética e biologia molecular das DMCs progrediram rapidamente, sendo a classificação continuamente atualizada. Nesta revisão apresentaremos os principais aspectos clínicos e diagnósticos dos subtipos mais comuns de DMC associados com alterações do complexo distrofina-glicoproteínas associadas-matriz extracelular que são DMC com deficiência de merosina (DMC tipo 1A), DMCs relacionadas com alterações do colágeno VI (DMC tipo Ullrich e miopatia de Bethlem), DMCs com anormalidades de gliocosilação da alfa-distroglicana (DMC Fukuyama, DMC "Muscle-eye-brain" ou MEB, síndrome de Walker-Warburg, DMC tipo 1C, DMC tipo 1D), além da raríssima DMC com deficiência de integrina. Outras formas mais raras de DMC, não relacionadas com o complexo distrofina-glicoproteínas associadas-matriz extracelular também serão apresentadas (DMC com espinha rígida, DMC tipo 1B, DMC com deficiência de lamina A/C) e, finalmente, algumas formas clínicas com fenótipo aparentemente específico que ainda não estão associadas com um defeito molecular definido. A patogenia e as perspectivas terapêuticas dos principais subtipos de DMC serão apresentados em um próximo número, na segunda parte desta revisão.

Efecto de cinco sistemas de pulido de resinas compuestas sobre superficie coronaria y radicular: Observación por medio de MEB y microscopía óptica / Effects of Five Composite Polishing Systems over Crown and Root Surface: SEM and Optical observations

El objetivo de este estudio in vitro fue describir la superficie coronaria y radicular alrededor de restauraciones de resina compuesta posterior a su pulido. Materiales y método: se realizaron 50 restauraciones estandarizadas sobre la superficie coronaria y 50 sobre la superficie radicular de dientes extraídos por indicación ortodóncica. Las cavidades se prepararon utilizando fresas cilíndricas de carbide (Meissinger®) con alta velocidad (Champion Dental Products Inc) bajo irrigación y fueron restauradas con resina compuesta híbrida (Filtek® Z 250, 3M®). Fueron separadas aleatoriamente en 5 grupos de 10 restauraciones coronarias y 10 radiculares. Cada grupo fue pulido utilizando un sistema diferente, siguiendo las indicaciones del fabricante. Grupo 1 (PB): Piedras de Arkansas (Dedeco). Grupo 2 (PD): piedras de diamante finas, extrafinas y ultrafinas (Diatech®). Grupo 3 (DOA): discos de óxido de aluminio (Sof lex®, 3M®). Grupo 4 (PG): puntas Enhance® (Dentsply®). Grupo 5 (FCT): fresas de carburo tungsteno de 16 y 30 cuchillo (Komet®). 10 dientes sin tratamiento se dejaron como grupo control (Grupo 6). Todas las muestras fueron observadas y fotografiadas mediante microscopía electrónica de barrido (TEAC Siemens®) y microscopía óptica (Carl Zeiss®). Las imágenes se compararon con las del grupo control. Resultados: la comparación de las microfotografías de los grupos tratados con las del grupo control mostró cambios en la corona y en la raíz en los grupos 1, 2, 3 y 4. En la corona se observó una pérdida de las características superficiales del esmalte y en la raíz una pérdida del cemento y exposición de dentina. En el grupo 5 algunas muestras presentaron modificación de la estructura superficial normal y otras no. Conclusión: los 5 sistemas de pulido de resinas compuestas analizados en este estudio modificaron la superficie del esmalte y el cemento.

The aim of this IN VITRO study was to describe the crown and root surface surrounding composite restorations, after polishing procedures. Materials and Methods: 50 standardized restorations were made over the crown surface and 50 over the root surface of teeth extracted by orthodontics indications. The cavities were prepared using cylindrical carbide burs (Meissinger) under water irrigation with a high speed hand piece (Champion Dental Products Inc) and restored with hybrid composite (Filtek Z250®, 3M®). They were randomized and separated into five groups of 10 restorations either in crown and root. Each group was polished using different systems, according to manufacturer’s instructions. Group 1(PB): Arkansas Stone (Dedeco). Group 2 (PD): Fine, extrafine and ultrafine Diamond Burs (Diatech®). Group 3 (DOA): Aluminum Oxide Discs (Sof lex® 3M®). Group 4 (PG): Enhance® Points (Dentsply®). Group 5 (FCT): 16 and 30 blades Tungsten Carbide Burs (Komet®). 10 teeth without treatment were used as control group (Group 6). All samples were analyzed and photographed by SEM (TEAC Siemens®), and Optical microscope (Carl Zeiss®). The images were compared with control group. Results: The comparison of the microphotography with control group showed changes in both crown and root surfaces in groups 1, 2, 3 and 4. It was seen a loss of the enamel superficial characteristics, in crown surfaces and a loss of the cementum and exposure of dentin in root. In group 5 some specimens resulted in a modification of normal tooth surface characteristics and in others there were no changes. Conclusions: The five composites polishing systems analyzed in this study resulted in enamel and cementum modification.